01  材料

PCR耗材的原材料通常是聚丙烯。它是一种非常好的耐热惰性物质（使用温度范围为-30〜140℃），表面不易于粘附生物分子，且有着良好的化学耐性，可以承受PCR反应热循环过程中的热能变化，并在PCR反应系统中很好地密封和保护该物质。

02   规格与尺寸

容量决定了反应体积与上样量。加样过多会导致热传导效率下降，溢出或交叉污染；而加样不足会引起样品蒸发损耗。qPCR仪的加热模块也会决定可适配的耗材和适用的反应体系大小。通量很容易理解，就是单次实验最多能上多少个样品。常见的容量和通量规格如下表所示：

·单管提供了设置准确运行反应数量的灵活性。另外，反应体积更大时，可选择0.5mL规格的单管。

·联管通常以8或12管形式，管盖分开或带有管盖。可兼容单通道和多通道移液器，适用于低通量和中通量实验。带有管盖的联管可独立打开和关闭样品管，以防止样品污染。

·为获得高效PCR，某些PCR仪热盖压力强大，因此可能需要使用特殊的托盘/支架来防止管子和联管被压碎。 

某些96孔PCR/qPCR板被设计成可分割的。该设计使得一整块96孔板可以轻松被分割成更小的板，在不需要使用一整块板时可减少耗材的浪费并降低成本。

每孔的高度也有不同：low profile（低位）耗材的高度更低，这种短小设计最大程度地减少了反应体系上方的空间（“死体积”——无用部分），降低热循环过程中的蒸发影响，同时能够让加热模块更大程度地将其包裹，提高热传导效率。因此，低容管也被称为“快速”管或板。有些仪器只能使用低位管，有些只能使用标准管，实验人员一定要根据自己的仪器选择对应匹配的耗材。

03  管壁厚度

PCR耗材的管壁厚度要均一，才能提供一致的热传导。但是管壁厚度会直接影响热传导率，极薄的壁厚可优化热传递减少循环时间，超薄管壁较标准版薄50%，带来更高的反应效率。

04  透明度

qPCR的管盖和封膜需要具有很高的光学透性，确保最佳的荧光信号的穿透和传递，但是管壁的透明度越高反倒会影响实验结果。qPCR 更推荐选用优质的白色 PCR 耗材。与传统的透明 PCR 产品相比，白色 PCR 产品可最大程度地反射荧光信号，减少孔间信号交叉污染，提高qPCR检测的灵敏度。

对于普通的PCR反应选用透明或者彩色的PCR管都是可以的，而彩色透明的PCR管更有助于进行样品分类管理。

05  裙边

PCR板的裙边指的是板的周围延伸部分。这个裙边作用是在构建反应体系时为移液过程提供稳定性支撑，以及结合自动化工作站时提供机械强度和抓手。常见的有三种：无裙边、半裙边和全裙边（对应下图A、B、C）。

简单理解如下：

无裙边板：可适用于大多数的 PCR 仪或 qPCR 仪，但不适用于自动化应用。移液过程中稳定性不高，需要配合板托使用。

半裙边板：可适配标签或应用条码，及自动化应用，且有着较好的移液稳定性。

全裙边板：非常适用于自动化实验应用，也可适配标签及应用条码。机械强度较好，可适用于凸出模块的 PCR 仪，且移液过程中稳定性高。

06  质量

这里强调一下耗材质量的重要性:qPCR耗材必须保证没有污染物和抑制剂。高压和辐射能够去除细菌和DNA酶，但不能去除灰尘和DNA残留，它们可能会抑制PCR反应或产生非特异性扩增。物质是具有吸光度的，即便是很小的污染物也会吸收反应体系中的荧光，影响荧光信号的采集。另外注意不要让耗材长期暴露在空气中，取出耗材后，一定要快速封好包装袋，避免用裸手接触。有条件的话，可在超净台中操作。

07  切角

切角是对PCR/qPCR板的一个角缺失，取决于所需要适配的仪器，目的是便于定位。

08  板面

适合的才是最好的。常见的PCR板有平孔缘和加高孔缘两种。

高孔缘的反应板，对于某些PCR仪器的最佳适配和性能是必需的，有助于在不需要适配器的情况下平衡热盖压力。且便于封膜，可降低样品间的交叉污染风险。

09  管盖

密封的选择类型如下：

联盖是用于密封联管和96孔板最常见的PCR / qPCR管盖形式。除了适配性外，透光度和形状也是在选择管盖时需要考虑的两个主要方面。

·虽然管盖的透明度对DNA扩增没有影响，但超透明或光学盖对于在qPCR实验中收集可靠数据非常重要。

·管盖的顶部可能是平顶（flat）或圆顶(domed)的。如何选择取决于所使用的PCR仪热盖设计。

·如果盖子具有稍微凹入的内表面以防止管子变形，则圆顶盖有助于确保适配以获得更好的PCR结果，同时充当压力吸收器以保持管子的完整性。

·平盖为书写标记提供了一个表面，设计用于带有平盖的PCR仪。用于qPCR检测的光学管盖通常是平顶的，以实现荧光信号的高保真传递。

10  封板膜

PCR封板膜由透明塑料或铝箔制成。黏性透明薄膜比较常见，适配于96或384孔板，qPCR的与PCR的塑料膜不同，要求要有足够好的光透性。操作时用个卡片把孔周围的膜压紧，避免漏气。

铝膜分为粘性与热封性，一般比较少见，仅适合PCR，铝模对于光敏样品是最理想的耗材，可以穿刺，便于PCR中样品转移。

总之，作为PCR体系构建的重要组成部分，塑料耗材对于实验以及数据收集的成功至关重要，特别是在中高通量的工作流程应用中。了解PCR/qPCR塑料耗材的基本信息将会有助于您作出正确的选择并获取最佳的PCR和qPCR结果。

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